TGF-β1抑制缺氧无血清诱导的骨髓间充质干细胞凋亡的研究

作者：郑丽芳; 梅元武; 张小乔; 张红; 白静; 查运红

来源：卒中与神经疾病, 2008, (02): 85-88.

• 转化生长因子β1
• 骨髓间充质干细胞
• 缺血性损伤
• Bcl-xL

目的观察转化生长因子β1(TGF-β1)对骨髓间充质干细胞(MSCs)体外模拟缺血性损伤的保护作用。方法采用密度梯度离心结合贴壁法分离、培养大鼠MSCs,对培养第3代的MSCs进行鉴定;用TGF-β11、2、5ng/ml分别预处理细胞6h,然后用血清剥夺和缺氧(SOD)处理建立MSCs体外模拟缺血性损伤模型,通过流式细胞术评价MSCs的凋亡及存活情况;采用Western blot方法检测2ng/ml TGF-β1对Bcl-xL表达的影响。结果密度梯度离心结合贴壁法能有效分离、纯化大鼠MSCs,免疫荧光检测显示培养的细胞CD29表达阳性,而CD34表达阴性;AnnexinV/PI双染流式细胞仪结果显示用2ng/ml TGF-β1预处理MSCs后,可抑制SOD诱导的细胞凋亡,其凋亡率明显下降,和其它组比较具有显著性差异(P<0.01);West-ern blot显示2ng/ml TGF-β1可升高Bcl-xL的表达,Bcl-xL/GAPDH(1.06±0.15)在6h达到高峰,和其它时间点比较具有显著性差异(P<0.01或P<0.05)。结论TGF-β1对SOD诱导的MSCs的凋亡具有抑制作用,其抗凋亡作用可能是通过促进Bcl-xL表达实现的。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属协和医院; 神经内科