HLA-A2限制性Survivin点突变肽诱导特异性抗肝癌CTL反应

作者：沈晗; 黄昭亮; 陈晓华; 林燕梅; 王腾; 邵红伟; 黄树林

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2012, (08): 696-701.

• Survivin
• 抗肝癌
• 点突变肽
• HLA-A2限制性

目的探讨HLA-A2限制性Survivin点突变抗原肽体外诱导CTLs的抗肝癌作用。方法生物信息学软件BIMAS和SYFPEITHI用来鉴定点突变的HLA-A2限制性Survivin抗原九肽;流式细胞术检测突变肽与HLA-A2分子结合效率;肽体外刺激肝癌患者腹水来源的肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)诱导反应性CTLs,用流式细胞术及ELISA检测反应性CTLs释放IFN-γ情况;肽诱导的CTLs与肝癌细胞系HepG2及BEL-7402共孵育,CytoTox 96~(?)非放射性细胞毒性检测法检测对肿瘤细胞的裂解情况,倒置相差显微镜观察肝癌细胞形态学变化。结果生物信息学分析筛选出与MHC分子结合效率评分显著提高的点突变Survivin抗原九肽Sur79M2(KMSSGCAFL),流式细胞术检测证实负载Sur79M2的T2细胞,HLA-A2表达率显著提高,经Sur79M2体外刺激诱导的CTLs与靶细胞共孵育后能释放较高水平的IFN-γ,Sur79M2诱导的CTLs能通过HLA-A2限制性机制有效杀伤肝癌细胞系HepG2,对HLA-A2阴性的BEL-7402细胞无明显杀伤作用。结论点突变肽Sur79M2能在体外诱导反应性CTLs产生,该CTLs能以HLA-A2限制性方式有效杀伤肝癌细胞系。

• 单位
  广东药学院; 南方医科大学; 广州市番禺区中心医院