摘要
目的探讨microRNA-143(miR-143)对白介素13(IL-13)诱导的人角质形成细胞组织激肽释放酶7(KLK7)表达的影响。方法取对数生长期人皮肤原代角质形成细胞(NHEK), 分别用0、2、10、50 μg/L IL-13处理24 h, 或用50 μg/L IL-13分别处理0、6、12、24、48 h后, 收集细胞, 提取细胞总RNA, 实时荧光定量PCR检测KLK7基因mRNA水平。再取部分NHEK, 分为4组, 即NHEK组(空白对照组, 既不转染也不用IL-13刺激)、IL-13组(仅用50 μg/L IL-13处理)、miR-NC组(转染microRNA mimics阴性对照后用50 μg/L IL-13处理)和miR-143组(转染miR-143 mimics后用50 μg/L IL-13处理), IL-13处理24 h后, 实时荧光定量PCR检测各组中KLK7 mRNA的相对表达水平, Western免疫印迹检测KLK7蛋白表达水平。结果 0、2、10、50 μg/L IL-13处理NHEK 24 h后, KLK7 mRNA的相对表达水平分别为1.00 ± 0.12、0.89 ± 0.04、1.15 ± 0.09和1.70 ± 0.10, 随着IL-13浓度的升高, KLK7 mRNA相对表达水平有上升趋势(F= 92.48, P<0.05)。50 μg/L IL-13分别处理NHEK 0、6、12、24、48 h后, KLK7 mRNA相对表达水平分别为1.00 ± 0.05、1.05 ± 0.12、1.71 ± 0.20、1.97 ± 0.19和2.48 ± 0.13, 随着IL-13处理时间延长, KLK7 mRNA的相对表达水平有上升趋势(F= 206.44, P<0.05)。与miR-NC组KLK7的mRNA和蛋白相对表达水平相比, miR-143组均降低, 差异有统计学意义(t值分别为6.76、4.23, 均P<0.05)。结论在人角质形成细胞中, IL-13上调KLK7的表达可能与miR-143的调控相关。
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单位北京协和医学院; 中国医学科学院; 北京协和医院