骨髓单个核细胞分化为CD103+树突状细胞的方法研究(英文)

作者：陈云秀; 吴毅; 彭欣; 孔潇; 李媛媛; 田小银; 张光莉; 罗征秀^*

来源：广西医科大学学报, 2019, 36(12): 1882-1888.

DOI：10.16190/j.cnki.45-1211/r.2019.12.002

• 单个核细胞
• CD103+ DCs
• GM-CSF
• FLT3L

目的:探索小鼠骨髓单个核细胞在体外培养诱导其分化为CD103+树突状细胞(DCs)的方法,为免疫性疾病的防治提供实验基础。方法:分离小鼠胫腓骨,冲洗骨髓腔得到骨髓细胞,利用单个核细胞分离液分离出单个核细胞,加入粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、Fms样酪氨酸激酶3配体(FLT3L)诱导其分化为成熟的DCs。显微镜下观察细胞大小、形态、分布,流式细胞术检测细胞CD103+及其共刺激分子的表达水平,再利用磁珠分选出CD103+DCs,检测其纯度。结果:单个核细胞培养8 d后,倒置显微镜下观察到细胞分化为多种形态,大部分呈圆形或不规则,大小不一,细胞周围有细小凸起,成簇状分布,细胞表面CD11c和CD103增多,表面标志物CD40、CD80、CD86和MHC-Ⅱ升高,磁珠分选纯化后CD103+DCs纯度可达95.7%,分选后的CD103+DCs可有效促进T细胞分化。结论:利用GM-CSF和FLT3L联合诱导法进行体外培养,能够得到纯度较高的CD103+DCs。

• 单位
  重庆医科大学附属儿童医院; 重庆市三峡中心医院