埃里希氏体病和莱姆病双重荧光定量PCR诊断方法的建立

作者:常瑾; 高超; 于喜冰; 李俊娇; 穆佳琦; 柴浩然; 成姗育; 尹仁福*
来源:中国兽医学报, 2021, 41(04): 697-703.
DOI:10.16303/j.cnki.1005-4545.2021.04.11

摘要

埃里希氏体病及莱姆病均为由蜱传播的虫媒性传染病,为建立同时诊断埃里希氏体病和莱姆病的诊断方法,本研究选择埃里希氏体的groEL基因及伯氏疏螺旋体的ospA基因为检测对象,建立同时诊断埃里希氏体病和莱姆病的双重荧光定量PCR方法,并对其特异性、灵敏性、稳定性、与以往的普通PCR方法的一致性进行了研究。结果显示,本方法仅可特异性扩增埃里希氏体及伯氏疏螺旋体的基因,对钩端螺旋体、立克次体、大肠杆菌、绿脓杆菌基因组扩增均为阴性,最低核酸检测限为1×101拷贝/μL,批内与批间重复试验Tm值的变异系数均小于0.1%。利用此方法对25份采自黑龙江省佳木斯市的全沟硬蜱样品进行检测,其中埃里希氏体和伯氏疏螺旋体的检出率分别为28%和60%。结果表明,本方法特异性好、灵敏度高、稳定性强,能同时检测埃里希氏体和伯氏疏螺旋体,可用于蜱传疾病的分子流行病学调查、鉴别诊断以及疫病防控。

全文