基于强阳离子交换色谱与等电聚焦的磷酸化蛋白质组学分离策略比较

作者：隋少卉; 董俊军; 王京兰; 蔡耘; 钱小红

来源：分析化学, 2012, (02): 177-183.

• 磷酸化肽段分离
• 强阳离子交换
• 等电聚焦
• 傅里叶交换离子回旋质谱 Phosphopeptide separation
• Strong cation exchange
• Isoelectric focusing
• Linear ion trap-Fourier transform ion cyclotron resonance mass spectrometry-mass spectrometry

比较分析了强阳离子交换(SCX)与等电聚焦(IPG-IEF)技术在磷酸化蛋白质组学中的应用。采用3种标准磷酸化蛋白对SCX与IPG-IEF两种技术对磷酸化肽段富集的有效性进行考察。以HepG2细胞为复杂样本,考察SCX与IPG-IEF在实际样本中的应用情况。对SCX与IPG-IEF技术在18O标记的磷酸化蛋白质组定量研究中的应用情况进行考察。蛋白鉴定采用高准确度、高灵敏度、高分辨率的LTQ-FTICR-MS/MS质谱仪。实验表明:SCX和IPG-IEF在大规模磷酸化肽段分离过程中均有效;在复杂样本中,SCX技术的分离效果优于IPG-IEF;IPG-IEF的重复性好于SCX;在磷酸化蛋白质组定量...

• 单位
  蛋白质组学国家重点实验室; 军事医学科学院放射与辐射医学研究所; 中国人民解放军防化学院; 北京蛋白质组研究中心