摘要
目的探讨微小RNA(miR)-34a靶向基质金属蛋白酶(MMP)2对肿瘤坏死因子(TNF)-α诱导人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo迁移和侵袭的影响。方法体外培养人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo,利用0.5μg/LTNF-α刺激细胞;将细胞分为对照组、TNF-α诱导组、NC组、miR-34a mimics组、iNC组、miR-34a inhibitor组;实时荧光定量PCR(qPCR)检测各组细胞中miR-34a、MMP2 mRNA的表达;CCK-8法、Transwell法和划痕实验分别检测各组细胞增殖、侵袭和迁移情况;蛋白免疫印迹法检测MMP2蛋白的表达;双荧光素酶报告实验证明miR-34a和MMP2的靶向关系。结果与对照组比较,TNF-α诱导组细胞miR-34a表达水平、细胞增殖抑制率显著升高(P<0.05),MMP2 mRNA和蛋白表达水平、细胞侵袭数目、细胞迁移率显著降低(P<0.05);与TNF-α诱导组和NC组比较,miR-34a mimics组细胞miR-34a表达水平、细胞增殖抑制率显著升高(P<0.05),MMP2 mRNA和蛋白表达水平、细胞侵袭数目、细胞迁移率显著降低(P<0.05);与TNF-α诱导组和iNC组比较,miR-34a inhibitor组细胞miR-34a表达水平、细胞增殖抑制率显著降低(P<0.05),MMP2 mRNA和蛋白表达水平、细胞侵袭数目、细胞迁移率显著升高(P<0.05);miR-34a与MMP2具有靶向关系。结论 miR-34a可能通过负调控MMP2的表达抑制TNF-α诱导的人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo迁移和侵袭。
-
单位河北省中医院