四氢姜黄素增强姜黄素抗乳腺癌作用机制初探

作者：张强; 曹世杰; 康宁^*

来源：中国药理学与毒理学杂志, 2019, 33(09): 730.

• 四氢姜黄素
• 细胞凋亡
• 乳腺癌

目的探讨口服姜黄素体内抗乳腺癌的作用及机制。即其主要代谢产物——四氢姜黄素增强姜黄素抑制乳腺癌细胞生长的作用及机制。方法用MTT法及克隆形成法检测姜黄素与四氢姜黄素单独或联合作用对人乳腺癌MCF-7、MDAMB-231细胞增殖的影响;用PI染色结合流式细胞术检测姜黄素和四氢姜黄素单独或联合作用对人乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231细胞周期分布的影响;用Annexin V/PI双染结合流式细胞术检测姜黄素和四氢姜黄素单独或联合作用对人乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231细胞凋亡的影响;用Western印迹法检测姜黄素和四氢姜黄素单独或联合作用后人乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231细胞中凋亡相关蛋白Fas、FADD、c FLIP、活化胱天蛋白酶3/8及PARP的表达水平。结果 10～40μmol·L-1的四氢姜黄素对于两种人乳腺癌细胞生长抑制作用较弱,而相同剂量的姜黄素可明显抑制乳腺癌细胞生长,两药联用对于MCF-7和MDA-MB-231细胞的生长抑制作用随时间的延长和药物浓度的增加而增加,且对肿瘤细胞的抑制作用明显强于对应的单药处理组,且多个剂量组合的CI值小于1。与对照组相比,四氢姜黄素及姜黄素单加或联用均不影响MCF-7及MDA-MB-231细胞的周期分布,但却发现姜黄素或四氢姜黄素联合姜黄素处理48及72 h后,两种细胞中sub-G1期细胞凋亡峰显著上调,且两药联用组的细胞凋亡比率显著大于姜黄素单加组。进一步Annexin V/PI双染结合流式细胞术的结果显示,与对照组相比,四氢姜黄素组没有凋亡产生,姜黄素组可随时间依赖性的诱导两种乳腺癌细胞发生凋亡,而四氢姜黄素与姜黄素联用后,细胞凋亡比率较姜黄素组有了极显著的增加。与对照组相比,姜黄素可上调Fas表达,且明显减少原型胱天蛋白酶3、胱天蛋白酶8和PARP的蛋白表达,相反,剪切形式胱天蛋白酶3、胱天蛋白酶8和PARP明显增加,同时下调抗凋亡蛋白cFLIP的表达,但四氢姜黄素对于以上蛋白作用并不明显,而四氢姜黄素与姜黄素共同处理后可以明显增加姜黄素对于以上凋亡相关蛋白表达水平的改变。结论四氢姜黄素能够在体外增强姜黄素诱导的乳腺癌细胞凋亡,提示姜黄素及其体内代谢产物共同发挥抗乳腺癌作用,且其代谢产物可能具有增效作用。

• 单位
  天津中医药大学