非洲猪瘟病毒K205R蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

作者：赵亚茹; 韩蓉; 杨吉飞; 牛庆丽; 关贵全; 罗建勋; 刘光远; 殷宏; GRZEGORZ Wozniakowski; 刘志杰^*

来源：中国兽医科学, 2019, 49(07): 805-811.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0092

• 非洲猪瘟
• 非洲猪瘟病毒
• K205R蛋白
• 单克隆抗体

将合成的非洲猪瘟病毒K205R基因序列插入p ET-28a(+)表达载体,经IPTG诱导表达p ET-28aK205R重组蛋白。用制备的重组抗原免疫BALB/c小鼠,采用化学融合方法融合、筛选,获得了6A4、7F5和7G3三株抗K205R蛋白的杂交瘤细胞株。经鉴定,这3株单克隆抗体(单抗)的亚类均为Ig G1型;单抗的腹水效价分别为1∶51 200、1∶409 600和1∶102 400。将这3株杂交瘤细胞连续培养20代,在第20代仍有很高的分泌抗体的能力,表明其稳定性较好。Western-blot检测结果表明,这3株单抗与K205R重组蛋白有良好的反应性和特异性。上述结果表明,本研究制备的这3株杂交瘤细胞株能够稳定分泌抗体,分泌的抗体特异性高,为非洲猪瘟诊断技术的研究奠定了基础。

• 单位
  家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心; 中国农业科学院兰州兽医研究所