摘要
目的探讨miRNA-188-5p(miR-188-5p)在皮肤鳞状细胞癌(鳞癌)组织和细胞中的表达, 分析其表达下调对皮肤鳞癌细胞增殖和侵袭能力的影响。方法 2012年11月至2018年10月在河南省新乡医学院第一附属医院收集50例手术切除的皮肤鳞癌组织及50例癌旁正常皮肤组织。实时荧光定量PCR(qPCR)检测皮肤鳞癌组织、癌旁正常皮肤组织、皮肤鳞癌细胞系SCL-1、A431、HSC-5和人永生化角质形成细胞株HaCaT细胞中miR-188-5p的表达。培养的A431和HSC-5细胞分别分为2组:miR-188-5p抑制剂组和阴性对照组, 对转染miR-188-5p抑制剂的细胞和阴性对照组细胞, 通过qPCR检测miR-188-5p的相对表达(2-△△Ct), 并以CCK8法和Transwell小室分别检测各组细胞的增殖活性和侵袭能力。双荧光素酶报告实验检测miR-188-5p和PTEN的相互作用, Western印迹法检测PTEN、总Akt(t-Akt)和磷酸化Akt(p-Akt)的表达。两独立样本比较采用t检验。结果皮肤鳞癌组织中miR-188-5p的相对表达(5.213 ± 3.138)显著高于癌旁正常皮肤组织(1.010 ± 0.364, t = 9.187, P < 0.001)。SCL-1、A431和HSC-5细胞中miR-188-5p的表达(3.858 ± 0.163、7.068 ± 0.262和4.572 ± 0.413)均显著高于HaCaT细胞(1.079 ± 0.300, t = 17.890、21.110和8.737, 均P < 0.05)。与阴性对照组相比, miR-188-5p抑制剂组A431和HSC-5细胞miR-188-5p表达显著下调(均P < 0.01), 细胞增殖和侵袭能力下降(均P < 0.05)。双荧光素酶报告实验显示, miR-188-5p表达下调显著上调A431和HSC-5细胞中PTEN的表达, 但抑制p-Akt的表达。结论 miR-188-5p在皮肤鳞癌组织和细胞中高表达, 且miR-188-5p表达下调可能通过调控PTEN/Akt途径, 抑制皮肤鳞癌细胞增殖活性和侵袭能力。
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单位新乡医学院第一附属医院