大鼠骨髓间充质干细胞向心肌样细胞诱导分化的体外条件研究

作者：李莉; 张发宝; 高平进; 杨黄恬; 朱鼎良

来源：中国分子心脏病学杂志, 2006, (03): 153-156+191.

DOI：10.16563/j.cnki.1671-6272.2006.03.008

• 骨髓间充质干细胞
• 5-氮胞苷
• 细胞分化
• 心肌细胞

目的研究体外条件下大鼠骨髓间充质干细胞(rat mesenchymal stem cells,rMSCs)向心肌样细胞分化的影响因素。方法采用免疫细胞化学方法检测rMSCs表面CD71、SH2、CD31、 CD34、CD45以及5-氮胞苷诱导后心肌细胞特异性蛋白α-sarcomeric actin、troponin T的表达;细胞计数法计算rMSCs倍增时间;观察不同传代数、不同时间及不同剂量5-氮胞苷、依地酸二钠(ethylenediami- netetraacetic acid tetrasodium salt,EDTA-2Na)及无血清培养液对rMSCs分化潜能的影响。结果rMSCs 表达CD71、SH2,而CD31、CD34和CD45呈阴性表达。第3代rMSCs经10μM 5-氮胞苷诱导后细胞呈现克隆、肌管等结,构,表达α-sarcomeric actin、troponin T等心肌细胞特异蛋白,细胞倍增时间为(100 ±8)h。第1、12代rMSCs诱导后细胞形态未发现明显改变、未出现上述结构,细胞倍增时间分别为 32±4 h、38±3 h。1、15、100μM 5-氮胞苷刺激12-72 h,2周后未发现克隆或肌管结构。5-氮胞苷刺激,以1 mM EDTA处理以及无血清培养液培养rMSCs形成的克隆、肌管结构不典型,α-sarcomeric ac- tin、troponin T表达较弱。结论rMSCs具有体外分化潜能,并且受细胞传代数、细胞倍增时间、诱导浓度和时间、细胞外钙离子浓度及培养条件等因素的影响。

• 单位
  中科院上海生命科学研究院; 上海交通大学; 上海交通大学医学院附属瑞金医院; 上海市高血压研究所