摘要

目的:在β-磷酸三钙环境下,观察富血小板凝胶(PRG)对成骨细胞增殖与分化和核因子E2相关因子2(Nrf2)/kelch样ECH关联蛋白1(Keap1)信号通路表达的影响。方法:取小鼠MC3T3-E1细胞,根据加入物质不同分为重组骨蛋白-1组、Nrf2抑制剂组、PRG组、Nrf2抑制剂+PRG组、生理盐水组。采用茜素红染色观察钙结节形成情况,CCK-8检测细胞增殖情况,免疫印迹试验(WB)检测碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)、骨桥蛋白(OPN)、Nrf2、Keap1蛋白表达水平,RT-PCR检测Nrf2 mRNA和keap1mRNA表达水平。结果:与Nrf2抑制剂组比较,重组骨蛋白-1组、PRG组、Nrf2抑制剂+PRG组、生理盐水组的钙结节形成个数增多(P<0.05),细胞增殖比例升高(P<0.05),Nrf2、Keap1及其基因表达水平升高(P<0.05);与生理盐水组比较,重组骨蛋白-1组和PRG组钙结节形成数明显增多(P<0.05),Nrf2抑制剂+PRG组次之(P<0.05)。与重组骨蛋白-1组和PRG组比较,Nrf2抑制剂组、生理盐水组和Nrf2抑制剂+PRG组的ALP、OCN、OPN蛋白表达水平降低(P<0.05),重组骨蛋白-1组的ALP、OCN蛋白表达水平高于Nrf2抑制剂组和生理盐水组(P<0.05),重组骨蛋白-1组的OPN蛋白表达水平高于Nrf2抑制剂组(P<0.05),生理盐水组的ALP蛋白表达水平高于Nrf2抑制剂组(P<0.05)。结论:PRG复合β-磷酸三钙可以促进成骨细胞增殖与分化,其作用机制可能与激活Nrf2/Keap1信号通路相关。