FimH重组蛋白的原核表达及纯化

作者：刘忠芳; 陈林; 殷晓佳; 李晓霞; 李宇红; 孟柳燕

来源：口腔医学研究, 2013, (10): 893-896.

DOI：10.13701/j.cnki.kqyxyj.2013.10.002

• FimH
• 大肠杆菌
• 沙门氏菌
• 重组蛋白
• 表达和纯化 FimH E.coli Salmonella typhimurium Recombinant protein Expression and purification

目的:在大肠杆菌中构建并表达3种FimH重组蛋白,并对FimH重组蛋白的培养条件进行优化,制备高纯度FimH重组蛋白。方法:采用原核表达载体pET28a构建出能表达FimH的重组质粒,并分别对诱导温度、IPTG浓度、诱导时间等条件进行优化,以提高重组蛋白的产量和增大其可溶性,最后以亲和层析分离纯化3种FimH重组蛋白。结果:成功构建出表达大肠杆菌(K12,BL21)和沙门氏菌(S.T.)FimH的原核表达载体pET28a-K12/BL21/S.T.,经酶切、测序和Western Blot鉴定,目的蛋白表达正确。在适当浓度的IPTG诱导,15℃震荡培养20h,可使FimH的表达量达到最大,分离纯...

• 单位
  武汉大学