摘要
目的探讨长链非编码RNA RP11-739N20. 2对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖和侵袭迁移的影响。方法采用实时定量PCR(q PCR)检测人正常肺上皮细胞BEAS-2B和NSCLC细胞(NCI-H1975、NCI-H1299、NCI-H157和A549)的RP11-739N20. 2水平;脂质体法向A549细胞转染3条靶向RP11-739N20. 2的小干扰RNA(siRNA)及阴性对照序列(si-NC)后经q PCR筛选干扰效果最显著的siRNA片段进行功能实验。根据转染情况将A549细胞分为转染siRNA片段的干扰组、转染si-NC的阴性对照(NC)组和未转染的空白对照(Blank)组,活细胞计数(CCK-8)法、划痕实验和Transwell小室实验检测细胞活力、划痕愈合率和穿膜细胞数以评估增殖和迁移侵袭能力,Western blotting检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、β-catenin和wnt-1的水平。结果 NSCLC细胞的RP11-739N20. 2水平均高于BEAS-2B细胞(P<0. 05),选取RP11-739N20. 2水平最高的A549细胞进行后续的干扰实验; A549细胞转染siRNA-1~3后的RP11-739N20. 2水平均低于转染si-NC的细胞及未转染细胞(P<0. 05),选取RP11-739N20. 2水平最低的siRNA-1片段进行后续功能实验。干扰组的RP11-739N20. 2水平、划痕愈合率和穿膜细胞数分别为0. 354±0. 022、(33. 179±3. 635)%和(96. 597±11. 031)个,均低于Blank组的1. 021±0. 027、(66. 396±3. 723)%和(187. 473±17. 116)个及NC组的1. 036±0. 037、(62. 025±4. 334)%和(182. 952±19. 593)个,差异有统计学意义(P<0. 05)。与Blank组和NC组相比,干扰组A549细胞的MMP-2、MMP-9、β-catenin和wnt-1的水平降低(P<0. 05);Blank组和NC组上述指标的差异无统计学意义(P>0. 05)。结论 NSCLC细胞中RP11-739N20. 2高表达且发挥促癌作用,通过RNA干扰下调其水平可导致增殖和侵袭迁移能力减弱,可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。
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单位南通市第一人民医院