DNA交联修复基因DCLRE1B对肝癌细胞侵袭和迁移影响的研究

作者：邓肇达; 王静; 李林成; 邹文博; 刘荣^*

来源：中国普外基础与临床杂志, 2022, 29(05): 585-593.

• DNA交联修复
• 肝癌
• 侵袭
• 迁移
• 生物信息

目的 探究DNA交联修复（DNA cross-link repair,DCLRE） 1B基因对肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响。方法 采用生物信息分析法对DCLRE1B mRNA在肝癌组织中的表达情况及其对肝癌患者预后的影响进行分析；采用免疫组织化学染色法（immunohistochemistry,IHC）检测手术切除的肝癌组织及其对应正常肝组织中DCLRE1B蛋白的表达情况；运用慢病毒介导构建DCLRE1B基因沉默的Huh7和HepG2肝癌细胞系，采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测其转染效果；采用划痕实验和Transwell法检测DCLRE1B沉默后的肝癌细胞Huh7和HepG2的迁移和侵袭能力；使用实时荧光定量-聚合酶链反应（quantitative real time-polymerase chain reaction,qRT-PCR）法检测DCLRE1B沉默后上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）相关基因改变情况。结果 (1)生物信息分析结果显示：DCLRE1B mRNA在多种肿瘤（包括肝癌）组织中呈高表达（P<0.05）; DCLRE1B mRNA的表达与肿瘤的TNM分期相关（P<0.05）；肝癌患者的DCLRE1B mRNA相对表达量与其预后相关，高表达组肝癌患者的总生存情况（P=0.038）和无进展生存情况较低表达组缩短（P=0.005）；单因素和多因素Cox比例风险回归分析结果显示，DCLRE1B的表达是影响肝癌预后的因素（P<0.05）。(2)手术切除的肝癌组织中DCLRE1B蛋白表达的阳性率高于正常肝组织（P<0.05）。(3)细胞实验结果显示：慢病毒介导构建DCLRE1B沉默的肝癌细胞系Huh7和HepG2后，其DCLRE1B蛋白表达均明显下调(P<0.01)；沉默DCLRE1B基因后的肝癌细胞的迁移和侵袭能力均明显减弱(P<0.05)；沉默DCLRE1B后，肝癌细胞上皮钙粘蛋白、基质金属蛋白酶9和和β-连环蛋白的mRNA表达上调（P<0.05），神经钙粘蛋白和波形蛋白的mRNA表达均下调（P<0.05），锌指转录因子mRNA表达无明显变化，差异无统计学意义（P>0.05）。结论 沉默DCLRE1B基因可以抑制肝癌细胞的迁移和侵袭能力，其机制可能与EMT过程有关。

• 单位
  中国人民解放军总医院