摘要
目的:探讨连翘苷(PHN)对氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的血管平滑肌细胞炎症损伤的影响及分子机制。方法:人主动脉血管平滑肌细胞(HA-VSMC)随机分为对照组、oxLDL组(50 mg·ml-1)、oxLDL(50 mg·ml-1)+PHN低(1μmol·L-1)、中(10μmol·L-1)、高(100μmol·L-1)剂量组、oxLDL(50 mg·ml-1)+anti-miR-483-3p组、oxLDL(50 mg·ml-1)+anti-miR-NC组、oxLDL(50 mg·ml-1)+PHN(100μmol·L-1)+miR-483-3p组、oxLDL(50 mg·ml-1)+PHN(100μmol·L-1)+miR-NC组。采用流式细胞术检测细胞凋亡率;Western Blot法检测活化的半胱胺酸蛋白酶(Cleaved-Caspase)3和Cleaved-Caspase9蛋白表达;ELISA法检测白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;RT-qPCR检测miR-483-3p表达水平。结果:低、中、高浓度连翘苷处理后,oxLDL诱导的HA-VSMC细胞凋亡率、Cleaved-Caspase3和Cleaved-Caspase9蛋白表达水平、IL-1β和TNF-α水平、miR-483-3p表达水平显著降低(P<0.05),且呈浓度依赖性。抑制miR-483-3p降低oxLDL诱导的HA-VSMC细胞凋亡率、Cleaved-Caspase3、Cleaved-Caspase9、IL-1β、TNF-α水平(P<0.05)。过表达miR-483-3p逆转了连翘苷对oxLDL诱导的HA-VSMC炎症损伤的作用。结论:连翘苷通过下调miR-483-3p表达从而抑制oxLDL诱导的HA-VSMC炎症损伤。
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单位保定市第一中心医院; 河北大学附属医院