引起猪腹泻的病毒分离鉴定

作者:林庆燕; 陈书琨; 孙洁; 唐金明; 陈兵; 卢体康; 刘建利; 廖立珊; 曾少灵; 祁振强; 阮周曦; 吕建强; 杨俊兴; 曹琛福; 张彩虹; 花群义; 秦智锋
来源:动物医学进展, 2014, (10): 75-78,79.
DOI:10.3969/j.issn.1007-5038.2014.10.017

摘要

为了对近年来引起仔猪腹泻的主要病毒进行分离鉴定,进而为疫苗的研发奠定基础,自2011年开始,从华南地区猪场连续3年检测出多个引起猪腹泻症状的病毒。其中2011年采用 MA-104细胞系从临床样品小肠内容物中分离到猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪轮状病毒 A(PRoVA),临床样品为2种病毒的混合感染。2012年分离到 PEDV、PRoVA 和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)3种病毒,临床样品为3种病毒混合感染。2013年从临床样品中只分离到 PEDV 1种病毒。通过在 Vero-76传代细胞系中前3代加入胰酶和猪胰酶,自第4代仅加入胰酶的方法,成功克服了 PEDV 的细胞毒性,实现了连续传代,并在第8代出现了细胞病变(CPE)。通过采用 IgY 抗体对 PEDV 和 PRoVA 混合感染的 MA-104细胞培养液连续中和和传代,成功分离纯化到猪轮状病毒 A。对9个猪场的3年猪腹泻病毒性疾病流行病学调查表明,2011年-2013年主要是以 PED 流行为主。

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