猪星状病毒GX1株衣壳蛋白表达及分析

作者：张文超; 崔真毓; 王蔚怡; 刘心; 刘欢^*; 黄伟坚^*

来源：中国动物传染病学报, 2022, 30(06): 165-172.

DOI：10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.2022.06.008

• 猪星状病毒
• 衣壳蛋白
• 杆状病毒表达系统
• 生物信息学分析

本研究旨在对猪星状病毒GX1株ORF2基因进行克隆构建、表达与其生物信息学分析，首先采用昆虫杆状病毒表达系统表达猪星状病毒（PAst V）GX1株衣壳蛋白，并对衣壳蛋白序列进行生物信息学分析。将RT-PCR扩增得到的PAstV-GX1 ORF2基因片段克隆至杆状病毒表达载体pFastBac-Dual中，获得重组质粒pFastBac-Dual-ORF2；随后将重组质粒转化至DH10Bac大肠杆菌感受态细胞，经蓝白斑筛选获得重组杆粒Bacmid-ORF2。将重组杆粒转染至sf9细胞中获得重组杆状病毒，待出现明显细胞病变后收取细胞毒，Western blot检测到Cap蛋白的成功表达。利用ExPASy和CBS等在线软件对PAstV-GX1 Cap蛋白的基本性质进行分析与预测。本试验通过昆虫表达系统Bac-to-Bac成功表达ORF2蛋白，并对其进行生物信息学分析，为PAstV1抗体的制备、检测试剂盒的研发及三维结构解析奠定基础。

• 单位
  广西中医药大学第一附属医院; 广西大学