Let-7a对人牙髓干细胞增殖、凋亡和成骨分化的影响

作者：刘岩; 单丹妮; 孙晶; 邹雨希; 袁长永^*

来源：上海口腔医学, 2023, 32(05): 468-474.

DOI：10.19439/j.sjos.2023.05.004

• let-7a
• 人牙髓干细胞
• 增殖
• 分化
• 凋亡

目的 ：研究let-7a对人牙髓干细胞（human dental pulp stem cells,hDPSCs）增殖、成骨分化、凋亡的影响及可能的作用机制。方法：通过let-7a mimics、let-7a agomir及let-7a inhibitor转染hDPSCs。将细胞分为4组，过表达对照组（let-7a control组/let-7a agomir control组）、过表达let-7a组（let-7a mimics组/let-7a agomir组）、敲低let-7a对照组（let-7a inhibitor control组）和敲低let-7a组（let-7a inhibitor组）。CCK-8法检测细胞在转染后继续培养24、48、72 h的增殖情况，茜素红染色检测钙化结节。Western印迹法检测细胞碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）、骨桥蛋白（osteopontin,OPN）、4E-结合蛋白（4E-binding protein 1,4EBP1）、p-4EBP1、哺乳动物类雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）和p-mTOR蛋白表达。Annexin V-APC/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒检测转染后的细胞凋亡水平。采用GraphPad Prism 5.0软件进行统计分析。结果：Let-7a抑制hDPSCs增殖，对细胞成骨向分化和凋亡具有促进作用。Let-7a可下调细胞内4EBP1、p-4EBP1、mTOR和p-mTOR的表达水平。结论：Let-7a可能通过抑制mTOR-4EBP1分子通路，从而抑制hDPSCs增殖，促进其成骨分化和凋亡。

• 单位
  南京市口腔医院; 南京大学; 徐州医科大学