携带小鼠beta防御素2的间充质干细胞对小鼠恶性腹水的抑制作用

作者：王国庆; 徐建容; 王瑞; 李红霞; 徐宁; 杜小波; 魏于全

来源：癌症, 2006, (06): 657-662.

• 防御素
• 慢病毒
• 干细胞
• 基因治疗
• 肿瘤
• 腹水

背景与目的:防御素是天然免疫的重要分子,小鼠beta防御素2(murinebetadefensin2,MBD2)是防御素家族的重要成员,在天然免疫和获得性免疫中具有桥梁作用。本研究观察携带MBD2的间充质干细胞(mesenchymalstemcell,MSC)对小鼠恶性腹水的抑制作用。方法:从BALB/c小鼠肾脏中提取总RNA,通过逆转录聚合酶链反应(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)得到小鼠MBD2片段。构建、包装表达MBD2的慢病毒Lentivirus系统。用所得病毒感染MSC,经筛选得到稳定表达MBD2的MSC,RT-PCR验证MBD2的表达。取稳定表达MBD2的MSC培养上清用于趋化树突细胞实验。BALB/c小鼠腹腔接种MethA细胞,于接种后第2、4、6、8天腹腔注射筛选所得表达MBD2的MSC或生理盐水、未感染病毒的MSC、感染Null-Lentivirus病毒的MSC,观察恶性腹水产生情况、腹水性状及荷瘤小鼠存活情况。对于长期存活小鼠,再次腹腔注射MethA肿瘤细胞,观察存活情况。结果:在MBD2-Lentivirus感染后的MSC中顺利扩增出MBD2片段。MBD2组细胞培养上清对树突细胞有较强的趋化作用[(43±8)个],明显高于生理盐水(NS)组[(8±1)个]、MSC组[(14±2)个]和Null组[(12±3)个],差异有显著性(P<0.01)。经表达MBD2的MSC处理的荷瘤小鼠腹水血性程度不明显,腹水总量[(3.0±1.0)ml]明显少于NS组[(10.8±1.0)ml]、MSC组[(10.2±1.3)ml]和Null组[(9.8±1.6)ml],差异有显著性(P<0.05)。MBD2组在肿瘤接种后第40天仍有小鼠存活,而各对照组至肿瘤接种后第20天已全部死亡,MBD2组存活时间显著长于对照组(P<0.05)。长期存活的MBD2组小鼠经MethA肿瘤细胞再次腹腔接种,其存活时间仍长于未作任何处理的对照组小鼠。结论:成功构建了以MSC为载体的MBD2基因治疗系统,经腹腔注射可以抑制恶性腹水的生长。

• 单位
  四川大学华西医院; 生物治疗国家重点实验室