摘要
目的探讨大黄素(EM)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)上皮间质转分化及线粒体融合蛋白2(Mfn2)的影响。方法采用CCK-8法检测不同浓度EM对HK-2细胞增殖的影响;实验分空白对照组、TGF-β1组、TGF-β1+EM(10、20、40μmol/L)组,EM干预组予以不同浓度的大黄素处理HK-2细胞30 min后,TGF-β1组和EM干预组同时给予浓度为10μg/L的TGF-β1刺激48 h收集细胞,Western blot法检测α-平滑肌肌动蛋白(a-SMA)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、结缔组织生长因子(CTGF)及Mfn2蛋白的表达。结果 CCK-8结果提示0、10、20、40、80、160μmol/L浓度的EM处理组的HK-2细胞存活率(%)分别为100.00±0.00、90.89±2.17、88.52±1.67、87.72±2.00、63.46±1.73、52.19±2.60,呈逐渐降低趋势(P<0.01);Western blot结果表明,与空白对照组比较,TGF-β1刺激后,HK-2细胞中α-SMA、CTGF及Mfn2蛋白水平升高,E-cadherin蛋白表达降低(P<0.05),与TGF-β1组比较,给予不同浓度大黄素干预后,α-SMA、CTGF及Mfn2蛋白水平降低,E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05),且呈一定剂量依赖性。结论大黄素缓解了TGF-β1诱导的HK-2细胞上皮间质转分化,可能通过减少TGF-β1诱导的Mfn2的表达来减缓肾脏纤维化。
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