犊牛睾丸支持细胞稳定转染pEGFP-N3的研究

作者:秦雪; 李琦; 冯瑞; 赵骞; 郑鹏*
来源:黑龙江动物繁殖, 2021, 29(04): 16-19.
DOI:10.19848/j.cnki.ISSN1005-2739.2021.04.0026

摘要

为获得稳定表达绿色荧光蛋白(pEGFP-N3)的支持细胞,试验分离纯化了犊牛睾丸支持细胞,然后利用Lipofectamine 2000进行转染和G418筛选。结果表明:利用胶原酶和胰酶消化,结合差速贴壁培养法,能获得较纯的支持细胞,细胞表达波形蛋白,纯度达到95%以上。G418筛选两周后,可得到稳定整合pEGFP-N3的支持细胞克隆。

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