摘要
目的 探讨ASB16反义RNA1(ASB16-AS1)在鼻咽癌组织中的表达及对鼻咽癌细胞增殖、凋亡的影响和作用机制。方法 采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测33例鼻咽癌组织和对应癌旁组织中ASB16-AS1和miRNA-363-5p的表达水平。将鼻咽癌细胞C666-1分为si-NC组、si-ASB16-AS1组、si-ASB16-AS1+antimiRNA-NC组和si-ASB16-AS1+anti-miRNA-363-5p组,分别采用CCK8法、克隆形成实验、流式细胞术检测细胞的增殖率、克隆形成数及凋亡率,采用蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中Ki-67、cleaved caspase 3、pro-caspase 3蛋白表达水平。采用双荧光素酶报告基因实验验证ASB16-AS1和miRNA-363-5p的调控关系。结果 鼻咽癌组织中ASB16-AS1相对表达量明显高于癌旁组织,miRNA-363-5p相对表达量明显低于癌旁组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01),且鼻咽癌组织中ASB16-AS1与miRNA-363-5p的表达呈负相关(r=-0.992,P﹤0.05)。siASB16-AS1组C666-1细胞的光密度(OD)值(48、72 h)、克隆形成数、Ki-67、pro-caspase 3蛋白相对表达量均低于si-NC组,细胞凋亡率、cleaved caspase 3蛋白相对表达量均高于si-NC组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。ASB16-AS1在C666-1细胞中负调控miRNA-363-5p的表达。si-ASB16-AS1+anti-miRNA-363-5p组C666-1细胞凋亡率、cleaved caspase 3蛋白相对表达量均低于si-ASB16-AS1+anti-miRNA-NC组,OD值(48、72 h)、克隆形成数、Ki-67、pro-caspase 3蛋白相对表达量均高于si-ASB16-AS1+anti-miRNA-NC组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论 ASB16-AS1可通过调控miRNA-363-5p促进鼻咽癌细胞增殖,抑制鼻咽癌细胞凋亡。
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