摘要
目的 研究轴突导向因子netrin-1基因沉默对胎盘血管生成的影响.方法 应用RNA 干扰技术分别沉默netrin-1基因在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和孕鼠胎盘组织中的表达;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性;克隆形成实验检测细胞增殖能力;细胞迁移实验检测细胞迁移能力;小管形成实验检测细胞管腔形成能力;观察胎鼠体质量;CD34因子的免疫组化链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(SABC)法检测孕鼠胎盘的微血管密度.结果 (1)HUVEC:沉默netrin-1基因后,HUVEC细胞活性受到抑制,克隆形成率由(69±6)%降至(46±5)%,迁移细胞数由(86±17)个降至(46±13)个,小管形成的分支点数由(37±9)个降至(17±5)个,HUVEC的netrin-1基因沉默前后比较,差异均有统计学意义(P<0.05).(2)孕鼠胎盘组织:沉默孕鼠胎盘组织netrin-1基因后,胎鼠体质量由(2.39±0.17)g降至(2.12±0.10)g,胎盘微血管密度由(258±38)条/mm2降至(197±32)条/mm2,孕鼠胎盘组织netrin-1基因沉默前后比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 沉默netrin-1基因,可以抑制体外HUVEC的细胞活性及增殖、迁移和管腔形成能力,同时使体内胎盘组织的血管生成能力下降.netrin-1是重要的促胎盘血管生长基因.
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单位华中科技大学同济医学院附属协和医院