沉默环状RNA溴域PHD手指转录因子通过靶向miR-15a-5p对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞损伤影响的研究

作者：黄德磊; 傅宏; 王梗

来源：中国糖尿病杂志, 2023, 31(04): 284-290.

• 糖尿病视网膜病变
• 人视网膜微血管内皮细胞
• 环状RNA溴域PHD手指转录因子
• miR-15a-5p
• 细胞增殖
• 凋亡
• 氧化应激

目的 探讨沉默环状RNA溴域PHD手指转录因子（circBPTF）对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞（hRMEC）损伤的影响及其可能作用机制。方法 取对数生长期hRMEC加入浓度为5.5 mmol/L葡萄糖培养基处理24 h为正常对照（Con）组，加入浓度为25 mmol/L葡萄糖培养基处理24 h为HG组。将si-NC、si-circBPTF、miR-NC、miR-15a-5p mimic、si-circBPTF和miR-15a-5p inhibitor（共转染）分别转染至hRMEC，转染成功后加入浓度为25 mmol/L葡萄糖培养基处理24 h，分别为HG+si-NC组、HG+si-circBPTF组、HG+miR-NC组、HG+miR-15a-5p mimic组、HG+si-circBPTF+miR-15a-5p inhibitor组。qRT-PCR法检测circBPTF、miR-15a-5p表达，试剂盒检测丙二醛（MDA）与超氧化物歧化酶（SOD）活性，细胞计数试剂盒8法与流式细胞术分别检测细胞活力及凋亡率，双荧光素酶报告实验检测circBPTF与miR-15a-5p的靶向关系，Western blot法检测活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3蛋白表达。结果 与Con组比较，HG组MDA、凋亡率、circBPTF表达升高（P<0.05）,SOD、细胞活力、miR-15a-5p表达降低（P<0.05）。与HG+si-NC组比较，HG+si-circBPTF组MDA、凋亡率、circBPTF表达降低（P<0.05）,SOD、细胞活力、miR-15a-5p表达升高（P<0.05）。与HG+miR-NC组比较，HG+miR-15a-5p mimic组MDA、凋亡率降低（P<0.05）,SOD、细胞活力、miR-15a-5p表达升高（P<0.05）。与HG+si-circBPTF组比较，HG+si-circBPTF+miR-15a-5p inhibitor组MDA、凋亡率升高（P<0.05）,SOD、细胞活力、miR-15a-5p表达降低（P<0.05）。Starbase预测显示，circBPTF与miR-15a-5p存在互补序列，上调miR-15a-5p表达可抑制转染野生型载体WT-circBPTF的细胞相对荧光素酶活性（P<0.05）。结论 沉默circBPTF可通过靶向调控miR-15a-5p表达促进细胞增殖及抑制细胞氧化应激、凋亡，减轻高糖诱导的hRMEC损伤。

• 单位
  大庆龙南医院