花生小GTP结合蛋白基因AhRabG3f启动子的盐胁迫响应元件分析

作者：杜国宁; 相杰; 林顺钰; 孔祥远; 武秀玲; 管学东; 朱虹; 王晶珊; 乔利仙; 隋炯明^*; 赵春梅^*

来源：生物工程学报, 2022, 38(08): 2989-2998.

DOI：10.13345/j.cjb.210656

• 花生
• 小GTP结合蛋白
• 启动子
• 盐胁迫响应元件

为研究花生小GTP结合蛋白基因AhRabG3f对盐胁迫响应的分子机制，文中克隆了花生AhRabG3f基因起始密码子上游1 914 bp的启动子片段(3f-P)。将该启动子5’末端截短获得5个片段(3f-P1-3f-P5)，长度分别为1 729、1 379、666、510、179 bp。构建了将这6个启动子片段与gus基因融合的植物表达载体，利用农杆菌介导法转化烟草。对转基因烟草进行GUS表达分析和酶活性检测，结果表明，在转入各启动子片段的烟草中，都能检测到gus基因的表达，其中全长启动子3f-P的驱动活性最弱，而截短片段3f-P3的驱动活性最强。对转基因烟草进行盐胁迫处理后，3f-P、3f-P1、3f-P2和3f-P3所驱动GUS酶活性是未经盐诱导的3.3、1.2、1.9、1.2倍，表明AhRabG3f启动子是盐诱导型的，在3f-P至3f-P3之间可能存在对盐响应的正调控元件。通过对盐胁迫处理后各启动子片段驱动的GUS活性分析，推测在AhRabG3f启动子上游1 930–1 745 bp、682–526 bp之间存在可能对盐响应的正调控元件MYB、GT1和富含TC的重复序列，1 395–682 bp之间存在可能对盐响应的负调控元件MYC。研究结果可为利用诱导型启动子调控花生的耐盐性提供指导。

• 单位
  生命科学学院; 青岛农业大学