摘要
目的建立免疫亲和柱净化-超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定奶粉中的维生素B12(VB12总量的方法。方法样品经胃蛋白酶酶解后,VB12从结合态脱离出来,再用1%的氰化钾沸水浴30min,将其转化为氰钴胺素,上清液经免疫亲和柱净化,以Waters HSS T3(2.1 mm×100mm,1.7μm)色谱柱分离,流动相由0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸乙腈溶液以梯度洗脱,配合多反应离子扫描(MRM)定性定量分析。结果 VB12检测线性相关性好,r≥0.9988;方法回收率用三个浓度进行添加试验,回收率范围为85.6%~92.7%;定量限为2μg/kg。结论本方法前处理简单,净化效率好,灵敏度高,可作为奶粉中VB12总量的有效检测方法。[营养学报,2020,42(1):72-77]
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单位杭州市食品药品检验研究院