HCV核心蛋白对HepG2细胞microRNA表达谱的影响

作者：吴燕; 曹炬; 黄世峰; 文阳安; 张莉萍

来源：基础医学与临床, 2012, 32(06): 618-622.

DOI：10.16352/j.issn.1001-6325.2012.06.011

• HCV核心蛋白
• HepG2细胞
• MicroRNAs
• 基因芯片

目的分析HCV核心蛋白(HCV-Core)对HepG2细胞microRNA表达谱的影响。方法将构建好的重组真核表达质粒pCDNA3.1(+)/HCV-Core用脂质体转染HepG2细胞,经G418筛选得到稳定转染HCV-Core的HepG2细胞,命名为HepG2-HCV Core细胞系。然后用反转录聚合酶链反应(RT-PCR),细胞免疫荧光和Western blot对HCV核心蛋白在HepG2细胞里mRNA和蛋白水平的表达情况进行验证。利用博奥生物公司的miRNA Array基因芯片,分析稳定表达HCV核心蛋白的HepG2细胞和转染空质粒pCDNA3.1(+)的HepG2细胞二者microRNA表达谱的差异,最后用Taqman探针荧光定量PCR法进行验证。结果感染HCV-Core后,HepG2细胞表达有差异的microR-NA有8种,用Taqman探针荧光定量PCR法进行分析,发现HCV核心蛋白可以上调miR-29、miR-146a、miR-149、miR-192、miR-221、miR-222和miR-193b,下调miR-196a。结论 HCV核心蛋白可以诱导肝细胞microRNA表达谱发生改变,在肝癌发生发展过程中发挥重要作用。

• 单位
  重庆医科大学附属第一医院