CYP3A4* 1G依赖的CYP3A4内含子10启动的真核表达载体的构建

作者:赵云龙; 杨卫红; 闫良; 魏璐嫚; 王沛; 张卫; 曾昭书; 张莉蓉
来源:郑州大学学报(医学版), 2016, (02): 153-157.
DOI:10.13705/j.issn.1671-6825.2016.02.004

摘要

目的:构建CYP3A4*1G依赖的CYP3A4内含子10启动的真核表达载体,研究CYP3A4*1G依赖的CYP3A4内含子10的启动子功能。方法:以质粒p GEM-CYP3A4为模板扩增出CYP3A4 c DNA,PCR产物经EcoRV、XbaⅠ双酶切后插入到pc DNA3.1/Hygro(+)的EcoRV、XbaⅠ双酶切位点之间,构建pc DNA3.1-3A4。分别以人基因组DNA和p GEM-CYP3A4质粒DNA为模板,扩增出CYP3A4启动子和CYP3A4内含子10全长(野生型和突变型)序列,插入到pc DNA3.1-3A4的MluⅠ、NheⅠ双酶切位点之间,取代原有的CMV启动子,构...

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