肺岩宁方调控TGF-β介导的骨转移相关PTHrP/RANKL信号通路抗肺癌侵袭转移

作者：张程程; 季青; 杨越; 吴新楠; 钦敬茹; 谢瑜; 李琦; 王中奇

来源：中国实验方剂学杂志, 2018, 24(03): 132-136.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.2018030132

• 肺岩宁方
• 转化生长因子-β
• 甲状旁腺激素相关蛋白
• 肺癌
• 侵袭转移

目的:探讨肺岩宁方通过调控转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)介导的骨转移相关甲状旁腺激素相关蛋白(parathyroid hormone-related protein,PTHrP)/NF-κB受体活化因子配体(receptor or activator of NF-κB ligand,RANKL)信号通路抗肺癌细胞侵袭转移的作用机制。方法:体外培养A549肺癌细胞,用不同终浓度肺岩宁方进行处理,未加肺岩宁方为空白组。分别采用cell counting kit-8(CCK-8)检测肺岩宁方对A549细胞增殖抑制作用,计算半数浓度抑制率(IC50);采用转移小室(transwell)侵袭实验、划痕实验检测肺岩宁方对A549细胞体外侵袭及迁移的抑制作用;以及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测TGF-β,PTHrP,RANKL蛋白表达。结果:肺岩宁方作用于A549肺癌细胞48 h后,与空白组相比,肺岩宁方(12.5,25,50 mg·L-1)组穿膜细胞明显减少(P<0.05,P<0.01);肺岩宁方(12.5,25,50 mg·L-1)组的划痕距离较空白组明显降低(P<0.05,P<0.01);且肺岩宁方(25,50 mg·L-1)组作用于A549细胞后,TGF-β蛋白表达明显下调(P<0.05),其对应下游靶基因PTHrP及RANKL蛋白也发生明显表达下调(P<0.05)。结论:肺岩宁方可抑制A549肺癌细胞的侵袭迁移能力,直接下调TGF-β基因及其下游靶基因PTHrP,RANKL蛋白表达,且具有浓度相关性。本研究证实了肺岩宁方通过调控TGF-β介导的骨转移相关PTHrP/RANKL信号通路,以达到抗肺癌侵袭转移的作用机制,这为肺癌临床靶向治疗提供了一定的实验依据,也显示了肺岩宁方作为抗肺癌侵袭转移药物广泛的应用前景。

• 单位
  上海中医药大学附属曙光医院; 上海中医药大学附属龙华医院