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摘要
为建立一种简单、快速的急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌(VpAHPND)检测方法 ，本研究根据pirB基因保守序列设计了多组引物和exo探针组合，经过筛选优化，建立了VpAHPND实时荧光RPA检测方法。结果显示，该方法在42℃恒温反应15 min即可快速、特异性地检测出急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌(VpAHPND)，与其他虾类病原和养殖环境中的致病菌不发生交叉反应，最低菌体细胞检出浓度为3.8×102CFU/mL，质粒检测限为1.17×101copies/μL，且具有良好的重复性。利用本研究建立的实时荧光RPA方法与WOAH推荐的实时荧光q PCR方法对50份人工感染的南美白对虾样品进行检测，二者检测结果一致。结果表明，本研究建立的检测方法操作简单，反应灵敏，仪器依赖性低，结果可靠，适用于实验室和现场对VpAHPND快速检测。
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