淀粉样β蛋白片段25～35下调大鼠海马PI3K/Akt/p70S6K信号传导通路Amyloid β-protein fragment 25-35 down-regulates PI3K/Akt /p70S6K pathway in rat hippocampus in vivo

作者：金英; 范莹; 闫恩志; 杨菁; 宗志红; 齐志敏

来源：Chinese Journal of Pharmacology and Toxicology, 2007, 21(2): 90-98.

DOI：10.3867/j.issn.1000-3002.2007.02.002

• 淀粉样β蛋白
• Akt/蛋白激酶B
• p70S6K
• 海马
• 信号传导

目的 探讨阿尔茨海默病(AD)的淀粉样β蛋白(Aβ)的沉积是否损害神经细胞存活的信号传导通路.方法 实验分为生理盐水对照组;Aβ25-35组;Aβ25-35+布洛芬组;Aβ25-35+布洛芬+LY294002组;Aβ25-35+LY294002组.大鼠分别灌胃给予布洛芬7.5或15 mg·kg-1,每日1次,连续3 周后,左侧脑室内注射Aβ25-35(10 μL,1 mmol·L-1),之后继续灌胃给予布洛芬1周.PI3K特异性阻断剂LY294002(5 μL,4 mmol·L-1)在注射Aβ25-35前1 h左侧脑室内注射.注射Aβ25-35后1周,取海马CA1区,Western免疫印迹法观察P53,Bax,FasL,Bcl-2,Akt和p70S6K的蛋白表达水平.应用半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)3活性测定试剂盒分析caspase 3活性变化,RT-PCR方法观察p70s6k mRNA表达水平.结果 脑室内注射Aβ25-35可引起大鼠海马CA1区磷酸化Akt/PKB和磷酸化p70S6K表达明显降低,分别从对照组1.32±0.14和0.769±0.028下降到0.69±0.08和0.479±0.032.同时,海马CA1区促凋亡蛋白P53,Bax和 FasL表达及caspase 3活性明显增加,抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显降低.预先注射LY294002可使caspase 3活性较单独注射Aβ25-35组进一步增加.给Aβ25-35前后连续给予布洛芬4周可明显对抗Aβ25-35引起的上述变化.LY294002可明显减弱布洛芬上调磷酸化Akt/PKB和磷酸化p70S6K表达的作用.结论 Aβ25-35引起抗凋亡通路PI3K/Akt/p70S6K下调可能参与AD的神经元损伤.布洛芬具有较好的对抗作用,这可能与上调PI3K/Akt/p70S6K通路中的一些蛋白有关.

• 单位
  生物化学教研室; 中国医科大学