高表达Krüppel样因子6对紫外线B诱导的人晶状体上皮细胞凋亡的影响

作者：田芳; 赵今稚; 黄亮瑜; 徐嫚鸿; 张哲; 滕贺; 张晓敏; 李筱荣; 东莉洁^*; 张红

来源：中华实验眼科杂志, 2019, (04): 257-262.

• Krüppel样因子6
• 晶状体上皮细胞
• 凋亡
• 紫外线B
• 氧化应激

目的 探讨Krüppel样因子6(KLF6)高表达对于紫外线B(UVB)诱导晶状体上皮细胞(HLECs)凋亡的影响。方法 利用脂质体转染的方法将已成功构建的真核表达质粒pEGFP-C2-KLF6转染到HLECs中,采用Western blot法测定细胞中KLF6蛋白的表达水平；采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测转染后细胞活力；经苏木精－伊红染色法观察细胞形态；采用Live/Dead染色法观察细胞受损情况；采用Western blot法检测细胞中凋亡标志物bax和bcl-2的相对表达量,并计算bax/bcl-2比值；采用细胞凋亡检测试剂盒定量测定细胞凋亡水平,并检测细胞中活性氧簇(ROS)的表达水平。结果 0.5 μg转染组和1.0 μg转染组细胞生存力较空载体对照组下降,差异均有统计学意义(均P<0.05)。KLF6高表达组细胞稀疏,细胞形态狭长,细胞质浓缩。正常对照组细胞形态稳定,数量均匀,为绿色活细胞；KLF6高表达组红色死亡细胞数量显著增多。UVB照射后,KLF6高表达组HLECs细胞凋亡值、bax相对表达量、bax/bcl-2比值、ROS表达量均高于空载体对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 高表达的KLF6通过调控凋亡相关蛋白的表达及促进内质网内ROS堆积来加剧UVB照射导致的HLECs凋亡,提示KLF6参与HLECs的凋亡调控。通过生物学手段特异性下调KLF6的表达有可能在一定程度上发挥对HLECs的保护作用。

• 单位
  天津医科大学; 天津医科大学眼科医院