摘要
目的 探讨维生素K2联合磷脂酰胆碱抑制人肝癌细胞的分子机制。方法 维生素K2联合磷脂酰胆碱处理人肝癌细胞(SMMC-7721)48 h,使用微小RNA(miRNA,miR)芯片检测处理后的人肝癌细胞miRNA表达水平,采用生物信息学预测miRNA的靶基因及靶基因所参与的功能分类、细胞信号通路,最后通过免疫蛋白印迹实验验证细胞信号通路的关键蛋白表达。结果 共有65个miRNA表达水平被显著上调或下调2倍以上,miR-16的表达水平变异最大,对比对照组上调了8 171.07倍(t=6.238,P<0.01)。65个miRNA分别有8~326个靶向基因,主要分布于上调部分和生物过程,其中miR-16有164个靶向基因。将靶向基因映射到信号通路后,Wnt信号通路富集靶基因最显著,有58个靶向基因(t=8.753,P<0.01)。免疫蛋白印迹实验中WNT3A和磷酸化β-连环蛋白(β-catenin)的低表达证实了经典Wnt信号通路参与了维生素K2联合磷脂酰胆碱抑制人肝癌细胞的过程(t=5.354,P<0.01)。结论 维生素K2联合磷脂酰胆碱通过上调miR-16表达,抑制Wnt信号通路,达到抑制人肝癌细胞的效果。
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单位武汉大学人民医院