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摘要
目的 探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)/热休克蛋白27(HSP27)通路在天麻钩藤饮干预自发性高血压大鼠(SHR)中的作用机制。方法 将30只SHR按随机数字表法分为模型组、缬沙坦组(0.03 g/kg)和天麻钩藤饮组(1 g/kg),每组各10只，WKY大鼠10只为正常组，缬沙坦组和天麻钩藤饮组大鼠分别给予相应药物灌胃，正常组与模型组大鼠灌胃等量生理盐水，连续8周。测量第0、14、28、42、56天各组大鼠的血压；给药结束后，观察各组大鼠的行为学变化；采用苏木精-伊红染色法观察血管形态结构变化，天狼星红染色法观察血管纤维化程度；采用电子显微镜观察细胞自噬超微结构；采用免疫荧光法检测血管组织中磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)和磷酸化HSP27(p-HSP27)的平均荧光强度；采用分光光度法检测血浆丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和血管组织抗超氧阴离子的含量；采用β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色法观察血管衰老改变；采用实时荧光PCR法检测血管组织中p38 MAPK、MAP激酶活化蛋白激酶-2(MAPKAPK-2)、HSP27、自噬相关蛋白5(ATG5)及p62 mRNA表达；采用蛋白质印迹法检测血管组织中p-p38 MAPK、磷酸化MAPKAPK-2(p-MAPKAPK-2)、p-HSP27、ATG5及p62蛋白表达。结果 与正常组比较，模型组大鼠血压和易激惹程度升高，旋转耐受时间缩短；血管中膜厚度(MT)和MT/血管内径(LD)的值增加，自噬小体数量减少，SA-β-gal阳性细胞率升高，MDA含量升高、SOD含量和抗超氧阴离子含量降低；p-p38 MAPK平均荧光强度升高，p-p38 MAPK、p-MAPKAPK-2蛋白及p62 mRNA和蛋白表达升高，p-HSP27平均荧光强度减少，HSP27、ATG5 mRNA和p-HSP27、ATG5蛋白表达下降(均P<0.05)。与模型组比较，缬沙坦组和天麻钩藤饮组大鼠血压和易激惹程度下降、旋转耐受时间延长；MT、MT/LD降低，自噬小体数量增多，SA-β-gal阳性细胞率减少，MDA含量降低、SOD含量和抗超氧阴离子含量升高；p-p38 MAPK平均荧光强度下降，p-p38 MAPK、p-MAPKAPK-2蛋白及p62 mRNA和蛋白表达降低，p-HSPA27平均荧光强度升高，HSP27、ATG5 mRNA和p-HSP27、ATG5蛋白表达升高(均P<0.05)。结论 天麻钩藤饮能够延缓SHR的血管衰老，其机制可能是通过p38 MAPK/HSP27通路调节细胞自噬实现的。
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