摘要

目的探讨环磷酰胺(CTX)联合高压氧(HBO)处理对人类风湿关节炎成纤维样滑膜(RA-FLS)细胞凋亡的影响。方法将培养好的人RA-FLS细胞按照随机数字表法分为4组:对照组、CTX组、HBO组及联合组(CTX+HBO处理), 分别予以不作处理、50 μmol/L的CTX处理、0.2 MPa HBO处理、50 μmol/L的CTX联合0.2 MPa HBO处理。CCK-8法检测人RA-FLS细胞的增殖能力;流式细胞术检测人RA-FLS细胞周期和凋亡情况, Western blotting实验检测人RA-FLS细胞凋亡及细胞周期阻滞相关蛋白的表达。结果 CTX组人RA-FLS细胞存活率明显低于HBO组和对照组(P<0.05), 而联合组人RA-FLS细胞存活被进一步抑制, 其存活率明显低于CTX组(P<0.05)。CTX组人RA-FLS细胞凋亡率明显高于HBO组和对照组(P<0.05), 而联合组人RA-FLS细胞凋亡率明显高于CTX组(P<0.05)。CTX组G2/M期的人RA-FLS细胞数量明显多于HBO组和对照组(P<0.05), 而联合组G2/M期的人RA-FLS细胞数量明显多于CTX组(P<0.05)。与对照组和HBO组比较, CTX组人RA-FLS细胞内TLR4蛋白、NF-κB p65蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与CTX组比较, 联合组人RA-FLS细胞内TLR4蛋白、NF-κB p65蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论 CTX+HBO处理对人RA-FLS细胞增殖具有明显的抑制作用, 其机制是通过调控TLR4/NF-κB信号通路并将人RA-FLS细胞周期阻滞在G2/M期实现的。

  • 单位
    长治医学院附属和平医院