高亲和力的农药克百威单克隆抗体的制备及鉴定

作者：杨金易; 吴青; 王弘; 潘科; 雷红涛; 肖治理; 郑晓锋; 孙远明

来源：中国农业科学, 2007, (03): 518-523.

• 克百威
• 单克隆抗体
• 免疫化学分析 Carbofuran
• Monoclonal antibodies
• Immunochemical assays

目的制备高亲和力农药克百威单克隆抗体,建立克百威残留免疫检测方法,控制克百威残留,保障人民身体健康与保护环境。方法合成克百威半抗原BFNB,用人工抗原BFNB-BSA免疫Balb/c小鼠,取脾细胞与骨髓瘤细胞在PEG4000作用下融合,经间接ELISA筛选及显微克隆法亚克隆,分离出阳性细胞株,腹水诱导法及辛酸-硫酸铵沉淀法大量制备及纯化单克隆抗体,间接ELISA法测定抗体滴度及亲和力,间接竞争ELISA法测定抗体特异性。结果获得1株稳定分泌抗克百威单克隆抗体的杂交瘤细胞株5D3,其培养上清和腹水抗体滴度分别为1﹕2.048×103和1:1.024×106,其抗体亚类为IgG1,亲和力常数为2....

• 单位
  广东省教育厅; 华南农业大学