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摘要
目的探讨葡萄糖诱导促进膀胱肿瘤细胞间隧道纳米管(TNTs)的形成及其机制。方法将高侵袭能力膀胱癌细胞T24用Mito-Tracker标记后,与低侵袭能力膀胱癌细胞RT4混合培养24 h,采用Actin-Tracker Green标记细胞骨架蛋白纤维型肌动蛋白(F-actin),观察两者之间是否形成隧道纳米管。RT4细胞和T24细胞分别培养12、24 h后收集细胞培养液,采用液相色谱和质谱分析法进行代谢组学分析,筛选出两种细胞微环境中的差异因子。采用微环境中的差异因子诱导T24细胞,进一步验证差异因子是否能诱导增强T24细胞形成TNTs的能力。Western blot法检测细胞骨架调节蛋白Fyn、Rho相关激酶(ROCK)及磷酸化桩蛋白(p-paxillin)的表达水平差异。结果 T24与RT4细胞之间混合培养可形成TNTs,其主要构成成分为F-肌动蛋白(F-actin)。代谢组学分析发现,葡萄糖为两细胞微环境的差异因子,能诱导促进T24与RT4细胞之间形成TNTs(P=0. 005)。T24与RT4细胞微环境之间葡萄糖浓度差异能上调细胞骨架相关蛋白Fyn、ROCK和p-paxillin的表达水平(P=0.001、0. 004、0.010)。结论不同侵袭能力膀胱癌细胞微环境中葡萄糖浓度差异能促进两细胞之间TNTs的形成。提高膀胱癌细胞微环境中葡萄糖的水平,能上调细胞骨架相关蛋白Fyn/ROCK/p-paxillin信号通路的活性,是葡萄糖诱导促进膀胱肿瘤细胞之间TNTs形成潜在的机制。
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