产抗菌肽PSI的重组乳酸克鲁维酵母高密度发酵及产物的分离纯化研究

作者：翟立翔; 李国丽; 冷艳; 李师翁; 陈熙明; 陈拓; 刘光琇

来源：食品与发酵工业, 2018, 44(04): 13-21.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.015872

• 抗菌肽PSI
• 乳酸克鲁维酵母
• 基因工程菌
• 高密度发酵
• 分离纯化

以实验室构建的产抗菌肽PSI的重组乳酸克鲁维酵母基因工程菌作为出发菌株,在摇瓶培养的基础上,建立了100 L发酵罐中高密度发酵工艺及产物分离纯化方法。研究了不同培养基、菌体密度、诱导物及其添加方式等对产物的影响。结果表明,用BSM培养基发酵培养至菌体密度达到190 g/L时开始添加乳糖诱导,乳糖添加量为5 kg,补料流加速度为1 L/h,诱导25 h,菌体细胞湿重达280 g/L,发酵液中蛋白产量达27.8 mg/L,抗菌肽PSI效价达到2.36×109U/L。采用多种分离纯化方法对发酵液中抗菌肽PSI进行分离纯化,结果表明,阴离子交换色谱纯化效率最高,纯化后蛋白效价为8.83×109U/L,其次为丙酮沉淀、超滤、硫酸铵分级沉淀,纯化后蛋白效价依次为6.35×109、4.56×109、3.28×109U/L。

• 单位
  甘肃省极端环境微生物资源与工程重点实验室; 中国科学院西北生态环境资源研究院; 生物工程学院; 兰州交通大学