Atrogin-1基因过表达对肌肉细胞营养状况的影响

作者：袁磊; 吴国豪; 张波

来源：外科理论与实践, 2008, (02): 145-148.

DOI：10.16139/j.1007-9610.2008.02.003

• 基因,Atrogin-1
• 慢病毒载体
• 肌营养不良
• 小鼠

目的:构建含Atrogin-1基因的慢病毒载体,并研究Atrogin-1过表达对骨骼肌细胞营养状况的影响。方法:PCR合成两端含酶切位点的Atrogin-1cDNA全长,酶切后多次重组使之克隆到慢病毒核心载体FG12中;经限制性酶切和测序鉴定重组载体后,用它感染小鼠成肌细胞,构建稳定株,将细胞进行分化,以Western印迹法检测Atrogin-1蛋白表达,并观察细胞形态学的变化。结果:Atrogin-1慢病毒载体中含有大小、序列正确的片段,感染该病毒的小鼠成肌细胞裂解液中能检测到Atrogin-1蛋白的高表达,且显示细胞明显萎缩。结论:成功构建了含Atrogin-1基因的慢病毒载体。该载体可使小鼠成肌细胞过表达Atrogin-1蛋白,引起肌肉细胞萎缩。

• 单位
  复旦大学附属中山医院