SOX9基因慢病毒载体的构建及其在骨髓间充质干细胞中的表达

作者：许运; 陈亮; 朱雪松; 施勤; 刘勇; 顾勇; 唐天驷

来源：中华医学杂志, 2010, 90(47): 3376-3380.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2010.47.018

• 椎间盘
• 遗传载体
• 干细胞
• SOX9基因 Intervertebral disk
• Genetic vector
• Stem cells
• SOX9 gene

目的构建SOX9基因的慢病毒载体并使其在兔骨髓间充质干细胞(MSCs)中表达。方法通过RT-PCR获得人SOX9基因编码区(CDS)片段,将该片段克隆入质粒Pwpxl-MOD2中产生Pwpxl-MOD2/SOX9,将Pwpxl-MOD2/SOX9、pRsv-REV、pMDlg-pRRE、pMD2G共转染293T细胞,获得携带目的基因SOX9基因的重组病毒。同时共转染Pwpxl-MOD2,pRsv-REV,pMDlg-pRRE,pMD2G进另一组293T细胞包装产生空载体慢病毒作为阴性对照。包装好的慢病毒体外感染MSCs,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法及免疫印迹检测SOX9的表达;四甲基...

• 单位
  苏州大学附属第一医院