摘要

目的 探讨ADP核糖基化因子样6相互作用蛋白(Arl6ip1)对电离辐射后小肠上皮细胞损伤的影响。方法 动物实验:C57BL/6N小鼠采用60Co源γ射线进行全腹部单次照射,剂量15 Gy,构建小鼠放射性肠损伤模型,测定正常对照组及照射后1,3,7和14 d小鼠空肠中Arl6ip1蛋白表达变化。细胞实验:设计3条不同序列的Arl6ip1-siRNA,以慢病毒[LV5(EF-1aF/GFP&Puro)]为载体,构建Arl6ip1敲低的小肠上皮细胞(IECv6细胞),分别用CCK-8法和γ-H2AX免疫荧光染色法观察细胞存活率和DNA损伤。结果 动物实验:与正常对照组相比,小鼠腹部照射15 Gy后第1和3 d,空肠组织中Arl6ip1表达显著降低(P<0.05,P<0.01);照射后第7和14 d,Arl6ip1表达无显著差异。细胞实验:阴性对照siRNA组和Arl6ip1-siRNA-565组慢病毒的转染效率均>80%。与阴性对照siRNA组相比,转染Arl6ip1-siRNA-565慢病毒的IEC-6细胞中Arl6ip1蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。照射15 Gy后,与阴性对照siRNA细胞相比,Arl6ip1敲低细胞γ-H2AX表达显著升高(P<0.01),细胞存活率显著下降(P<0.01)。结论 Arl6ip1低表达可促进照射后细胞DNA损伤,抑制细胞活力,从而加重电离辐射所致小肠上皮细胞损伤。

  • 单位
    河北北方学院; 解放军总医院