摘要
为了对石斛碱生物合成途径进一步解析,对石斛碱生物合成途径研究进展、5种药用萜类生物合成的CYP450酶功能、CYP450酶研究手段三个方面进行文献综述。通过综述石斛碱生物合成研究进展,提出CYP450酶在石斛碱合成途径中羟基化中间体的作用;总结对药用萜类青蒿酸、丹参酮、鼠尾草酸、人参皂苷、甘草甜素等合成途径中CYP450酶的功能研究与鉴定,发现CYP450酶在萜类化合物中的主要功能为羟基化、酮基化等氧化功能;总结CYP450酶的研究手段:一方面基因的筛选可以通过数据库检索或植物组织、多因子诱导表达差异筛选,另一方面基因的表达和功能鉴定通过基因工程的多种手段,转入原核或真核宿主细胞中表达出酶蛋白,然后加入底物鉴定其催化活性。最后,展望下一步石斛碱生物合成CYP450酶的挖掘,认为可以通过已有的转录组中筛选出差异CYP450酶基因并进行蛋白表达,然后通过上游酶催化或从植物中分离纯化的方式获得底物,从酶蛋白与底物的催化挖掘与石斛碱合成相关CYP450酶类。
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单位生物工程学院; 中国医学科学院药用植物研究所; 重庆大学