极端耐盐放线菌白色普氏菌YIM 90005~T四氢嘧啶及5-羟基四氢嘧啶合成相关基因的克隆

作者:李岩; 董雷; 王磊; 方福瑾; 何敏; 曹中莹; 梁媛; 唐蜀昆; 李文均
来源:微生物学报, 2011, 51(05): 603-608.
DOI:10.13343/j.cnki.wsxb.2011.05.012

摘要

【目的】为了研究耐盐放线菌对高盐环境的适应机理。【方法】用HPLC定量检测了极端耐盐、丝状产孢放线菌———白色普氏菌(Prauserella alba)YIM 90005T在不同盐浓度下胞内相容性溶质的种类和含量。【结果】结果发现,四氢嘧啶和5-羟基四氢嘧啶是其主要的相容性溶质。在培养基NaCl浓度为10%时,四氢嘧啶在胞内累积浓度最大,为18.77μg/mg干菌体重。之后随NaCl浓度的升高,胞内的四氢嘧啶含量逐渐减少,而5-羟基四氢嘧啶的含量逐渐增加,在该菌耐受的最高NaCl浓度下(24%w/v),胞内5-羟基四氢嘧啶含量达到最大值,为22.98μg/mg干菌体重。设计兼并引物,利用染色体步移,克隆得到四氢嘧啶及5-羟基四氢嘧啶合成相关基因ectABCD。序列分析表明,ectABCD位于一个操纵子中。进一步对不同NaCl浓度培养条件下ectB,D的表达量进行定量分析,结果表明该基因簇表达量随着培养基中NaCl浓度的增加而增大。【结论】研究结果证实5-羟基四氢嘧啶是P.alba YIM 90005T在极高盐浓度条件下起渗透调节及保护的相容性溶质。

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