大鼠脑微血管内皮细胞的纯化培养与鉴定

作者：鹿文葆; 秦伟伟; 刘淑英; 李宏伟; 修瑞娟

来源：中国脑血管病杂志, 2011, (10): 535-538.

• 内皮细胞
• 脑微血管
• 细胞
• 培养的
• 大鼠
• 体外研究 Endothelial cells
• Cerebral microvascular
• Cells
• cultured
• Rats
• In vitro

目的探讨获取纯度较高的原代大鼠脑微血管内皮细胞(BMECs)的分离和培养方法。方法选取10只3周龄Wistar大鼠,取大脑,去除白质,剪碎成大约1 mm~3大小,通过两次酶消化、20%BSA离心和33%连续密度Percoll梯度离心,获得纯度较高的大脑微血管片段,接种于涂布明胶的35 mm dish培养皿中,加入含4μg/ml嘌呤霉素的内皮细胞培养基,2d后更换新鲜培养基;采用倒置显微镜观察内皮细胞生长状况及其形态;免疫组化法检测BMECs标志物Ⅷ因子相关抗原(vWF)的表达,以及神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)的表达情况。结果培养24 h后可见内皮细胞从贴壁的脑微血管片段周围长出,细胞呈梭...

• 单位
  中国医学科学院基础医学研究所; 中国医学科学院北京协和医院; 中国医学科学院微循环研究所