抗HER2单抗报告基因法检测抗体依赖性细胞吞噬作用生物学活性方法的建立及应用

作者：刘春雨; 于传飞; 付志浩; 崔永霏; 杨雅岚; 王兰^*

来源：中国药学杂志, 2022, 57(23): 1991-1997.

• 抗人类表皮生长因子受体2单抗
• 单克隆抗体
• 抗体依赖性细胞吞噬作用
• 生物学活性
• 报告基因
• 实验设计
• 优化
• 验证

目的 利用报告基因法建立抗人类表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2, HER2)单抗的抗体依赖性细胞吞噬作用(antibody-dependent cell-mediated phagocytosis, ADCP)生物学活性检测方法。方法 以Jurkat/NFAT/CD32a-FcεRIγ转基因细胞系作为效应细胞，SKBR3细胞系为靶细胞，通过荧光素酶检测系统建立抗HER2单抗的ADCP测活方法，并运用实验设计(design of experiment, DOE)方法进行实验优化和方法学验证。结果 该方法量效关系符合四参数方程：y=(A-D)/[1+(x/C)B]+D,方法优化确定量效范围为400～3.959 ng·mL-1,靶细胞接种密度为每孔1.5×104个，效靶比为5∶1,诱导时间为7 h。该方法具有良好的专属性；不同稀释组样本百分相对效价分别为(55.04±1.35)%、(78.10±6.33)%、(102.69±5.21)%、(133.32±2.58)%和(152.87±8.11)%;回收率在101%～110%,相对标准偏差(RSD)均小于10%。结论 本研究成功建立抗HER2单抗ADCP生物学活性方法，该方法专属性强、重复性好，准确性高，可作为抗HER2单抗ADCP生物学活性的评价方法。

• 单位
  中国食品药品检定研究院