天花粉蛋白的制备及其性质

作者：杨烨; 范翔; 李刚锐; 李林俐; 栗克喜; 孟延发

来源：华西药学杂志, 2014, 29(05): 510-512.

DOI：10.13375/j.cnki.wcjps.2014.05.008

• 天花粉蛋白
• SOD活性
• 核糖体失活蛋白
• 两步层析法
• 栝楼

目的采用两步层析法快速制备天花粉蛋白(TCS),并验证其SOD活性。方法粉碎栝楼块茎并抽提,经硫酸铵分级沉淀,再经Blue-Sepharose CL 6B和SP-Sepharose两步层析,可获得TCS纯制剂;采用SDS-PAGE和PAGE鉴定其均一性;用MTT法检测TCS对Hela细胞的抑制作用;采用PAGE-NBT活性染色法与邻苯三酚自氧化法相结合检测了TCS的SOD活性。结果用两步层析法可获得高纯度和高收率的TCS;经SDS-PAGE和PAGE鉴定,均为单一蛋白质着色带;TCS对Hela细胞增殖具有明显抑制作用,呈时间和浓度依赖关系;TCS不具有SOD活性。结论所用TCS纯化方法简单、快速、收率高,可大量制备具有生物活性的TCS,同时也首次证明了TCS不具有SOD活性。

• 单位
  四川大学; 成都生物制品研究所有限责任公司; 生命科学学院