摘要
目的 探讨经典Wnt通路对小鼠骨髓来源间充质干细胞(mMSCs)向Ⅱ型肺泡上皮(AT Ⅱ)细胞分化的作用和机制.方法 直接贴壁法原代分离C57BL/6小鼠骨髓MSCs (mMSCs),通过表面标志物流式细胞学检测和成脂、成骨、成软骨诱导分化以对其进行鉴定.在MLE-12细胞共培养结合SAGM体外诱导mMSCs分化为AT Ⅱ细胞的基础上,分别加入经典Wnt通路激活剂LiC1、Wnt3a或抑制剂DKK 1调节mMSCs经典Wnt信号.诱导分化后提取mMSCs的蛋白和mRNA,Western blot检测经典Wnt通路相关信号分子GSK3 β和β-catenin及Ⅱ型肺泡上皮细胞特异性蛋白pro-SPC的表达,qRT PCR检测SPC、SPB、SPD和AQP5 mRNA水平,以评价经典Wnt途径对mMSCs向AT Ⅱ细胞分化的作用.
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单位东南大学附属中大医院