H5N1亚型禽流感病毒HA蛋白的原核表达

作者：杨理凯; 郭苗苗; 杜伟立; 丁锐; 王令; 张涛; 路宏朝

来源：动物医学进展, 2018, 39(08): 10-14.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2018.08.003

• 禽流感病毒
• 血凝素
• 原核表达
• 诱导条件

血凝素(hemagglutinin,HA)是禽流感病毒的主要抗原之一,原核表达HA是该抗原特性研究和疫苗制备的关键。利用分子生物学方法构建H5N1亚型的禽流感病毒HA基因原核表达载体,转化至大肠埃希菌Rosetta菌株,用不同IPTG浓度和时间诱导HA表达,检测蛋白表达量,分析不同诱导条件对HA表达效率的影响,以确定最佳诱导条件。重组表达载体pET32a-HA经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切鉴定,获得预期大小的DNA片段,说明HA基因成功插入质粒pET32a。Western blot检测结果表明,IPTG诱导重组菌株成功表达HA蛋白,当诱导浓度为0.1mmol/L,诱导时间为6h时,HA蛋白表达量最高。研究结果为HA抗原制备及禽流感疫苗的研究奠定基础。

• 单位
  陕西理工大学