非洲猪瘟病毒实时荧光RAA检测方法的建立

作者：赵凯颖; 曾德新; 胡永新; 钱炳旭; 薛峰^*; 钱莺娟; 吴晓东^*; 戴建君

来源：中国兽医科学, 2021, 51(01): 1-8.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2021.0004

• 非洲猪瘟病毒
• 重组酶介导等温扩增方法
• 检测

为了建立非洲猪瘟病毒(ASFV)简捷、高效的基层临床检测方法,本研究选取非洲猪瘟病毒保守基因B646L (P72)序列,设计特异性引物和探针,建立非洲猪瘟病毒实时荧光重组酶介导等温扩增(RAA)检测方法。结果显示,所建立方法与OIE推荐的荧光定量PCR方法灵敏度相当,低至10 copies,μL,检测时长仅需10 min,与口蹄疫病毒(FMDV)、猪细小病毒(PPV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)均无交叉反应。对100份临床样品的检测结果与OIE推荐的荧光定量PCR结果一致,但相较于荧光定量PCR检测时间的2h,检测时间大大缩短。结果表明,本研究建立的方法灵敏度较高、特异性较好,为ASFV早期临床诊断提供了技术支持。

• 单位
  中国动物卫生与流行病学中心; 南京农业大学